Como é feito o DNA recombinante?

Como é feito o DNA recombinante?

Um gene humano é isolado através de uma enzima de restrição que separa o DNA em determinados pontos. As enzimas também cortam o genoma bacteriano em um determinado ponto. O DNA recombinante aparece na mistura do gene de interesse humano com o plasmídeo bacteriano.

Qual a importância da utilização de técnicas do DNA recombinante?

Na farmacologia, a tecnologia do DNA recombinante tem sido utilizada principalmente para a produção de insulina humana em escala comercial, fatores de coagulação, hormônio do crescimento e atualmente estão sendo testadas a partir dessa tecnologia drogas voltadas ao tratamento do câncer e da AIDS.

O que é um DNA recombinante e como ele é feito?

São moléculas de DNA produzidas a partir da combinação de sequências de DNA proveniente de diferente fontes. A técnica central da metodologia do DNA recombinante é a clonagem molecular. A tecnologia do DNA recombinante é um conjunto de técnicas que permitem a manipulação do DNA.

O que é um plasmídeo e qual sua importância para a técnica do DNA recombinante?

O plasmídeo bacteriano possui a capacidade de inserir um fragmento de DNA externo ao seu próprio genoma. Essa técnica consiste na formação de DNA recombinante. A partir do DNA recombinante, os plasmídeos são usados para multiplicar ou expressar genes de interesse.

Qual é a importância da técnica de eletroforese no estudo do DNA?

A eletroforese é muito utilizada e tem papel importante na análise laboratorial e também em pesquisas científicas. Essa técnica foi empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico Arne Tisélius e permite realizar a separação de macromoléculas como DNA, RNA, proteínas e enzimas com tamanhos e cargas diferentes.

Como o DNA recombinante é produzido usando plasmídeos?

O fragmento de DNA é inserido em um vetor, que é uma molécula de DNA na qual um gene é inserido para construir a molécula de DNA recombinante. Geralmente os plasmídeos (moléculas de DNA circulares existentes naturalmente nas bactérias) são usados como vetores para clonar fragmentos de DNA.

Como funciona a molécula de DNA recombinante?

• Assim, o fragmento do gene alvo se une ao vetor, através da DNA ligase, formando o plasmídeo recombinante contendo o gene de interesse. A DNA ligase é a responsável por selar as lacunas do eixo do DNA, funcionando como uma “cola”. A molécula de DNA recombinante produzida é introduzida em um organismo hospedeiro, podendo então ser replicadas.

Como é produzido o DNA recombinante?

• Como o DNA recombinante é produzido? A obtenção do DNA recombinante baseia-se na técnica de clonagem molecular. O processo pode ser resumido do seguinte modo: O primeiro passo é isolar um fragmento de DNA, que contém o gene de interesse. Lembre-se que cada gene origina uma proteína.

Como introduzir o DNA recombinante em bactérias?

• O próximo passo é introduzir o DNA recombinante em bactérias vivas ou diretamente em meio de cultura com as mesmas. Após a incorporação do DNA recombinante, as bactérias serão capazes de produzir um nova proteína, conforme os genes do fragmento de DNA isolados inicialmente.

Como construir uma molécula de DNA híbrida?

• Construção de uma molécula de DNA híbrida a partir de fragmentos de diferentes organismos obtidos com o uso de enzima de restrição. A figura 3 mostra uma molécula de DNA de plasmídeo que tem somente um sítio de clivagem para uma determinada enzima de restrição. A mesma enzima é usada para clivar DNA humano.